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當前位置:首頁技術文章孔雀石綠檢測試劑盒樣本前期處理以及注事事項有哪些?

孔雀石綠檢測試劑盒樣本前期處理以及注事事項有哪些?

更新時間:2019-09-12點擊次數:1899

孔雀石綠檢測試劑盒樣本前期處理以及注事事項有哪些?

5 樣本前處理

5.1 樣本處理前須知:

實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結果。

5.2 配液:

配液1:1×樣品復溶液

以100 ml為例,取10 ml 10×復溶液加入50ml去離子水和40ml甲醇,充分混勻

配液2:1×工作洗滌液

濃縮洗滌液20倍稀釋(1份洗滌液加19份去離子水)。

5.3 樣本前處理步驟:

5.3.1 魚、蝦

1)取勻質無骨的樣品1 g加入50 ml離心管中,加入0.3 ml 乙腈、6 ml乙酸乙酯充分震蕩(不少于5分鐘確保魚肉沒有結塊)

2)室溫下4000r/min 離心10min,取上清液3 ml加入10ml玻璃試管中,再加入氧化劑50 ul,震蕩2分鐘;

3)每管加入助溶劑50 ul(不振蕩),50℃水浴環境下氮氣吹干(吹完之后管底部應該有一滴液狀物,當樣本含油脂過高時,此時可見試管底部殘留有黃色粘稠狀液滴)

4)加入1 ml 1×樣品復溶液,溶解混勻,取50ul用于分析。

    樣本稀釋倍數:2     檢測下限:0.1ppb

6 注意事項

6.1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導致所有標準的OD值偏低。

6.2 在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。

6.3 混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現性,很大程度上取決于洗板的一致性。

6.4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。

6.5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6.6 顯色液若有任何顏色表明變質,應當棄之。0標準的吸光度值小于0.5個單位(A450nm< 0.5 )時,表示試劑可能變質。

6.7 反應終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。

 

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